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NobleRyder Bradford蛋白定量試劑盒

  • 型   號:P2802
  • 價   格:
  • 更新時間:2024-09-26
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

NobleRyder Bradford蛋白定量試劑盒
NobleRyder 即用型液體試劑 P2802-500T
NobleRyder 即用型液體試劑 P2802-1000T

Bradford蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品簡介:

目前世界上*常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford Protein Assay Kit) 。Bradford 法與傳統(tǒng)方法相比,更簡單、更穩(wěn)定、兼容性更好。Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學(xué)物質(zhì)的影響。樣品中β-巰基乙醇的濃度可高達1M,DTT的濃度可高達5mM。但受高濃度的去垢劑的影響明顯, 故在用Bradford Protein Assay Kit進行蛋白定量時,需確保SDS低于0.01%,Triton X-100低于0.05%,Tween 20, 60, 80低于0.015%。含高濃度去污劑的蛋白定量,建議采用BCA Protein Assay Kit。

NobleRyder Bradford Protein Assay Kit主要由G250、緩沖液等組成,檢測速度很快,少量樣品一般只需10min即可完成檢測。檢測濃度下限達到25μg/ml,最小檢測蛋白量達到0.5μg,待測樣品體積為1~20μl。在50~1000μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關(guān)系。

 NobleRyder Bradford蛋白定量試劑盒 

產(chǎn)品組成:

                        編號

名稱

P2802

500T

P2802

1000T

Storage

試劑(A): G250染色液

100ml

200ml

4℃ 避光

試劑(B): 蛋白標(biāo)準(BSA 5mg/ml)

1ml

2ml

-20℃

使用說明書

1份

 

自備材料:

1、 酶標(biāo)儀或分光光度計

2、 蒸餾水

3、 96孔板

 

操作步驟(僅供參考)

1、 wan全溶解蛋白標(biāo)準(BSA 5mg/ml),按蛋白標(biāo)準:稀釋液=1:9進行稀釋,如取蛋白標(biāo)準10μl稀釋溶解于稀釋液90μl,使其終濃度為0.5mg/ml。注意:蛋白樣品在什么溶液中,蛋白標(biāo)準也應(yīng)用什么溶液稀釋。也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋蛋白標(biāo)準(BSA 5mg/ml)。

2、 將標(biāo)準品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板的蛋白標(biāo)準孔中,加蛋白標(biāo)準稀釋液補足至20μl。

3、 加適當(dāng)體積樣品到96孔板的樣品孔中,補加標(biāo)準品稀釋液至20μl。

4、 各孔加入200μl G250染色液,室溫放置3~5min。

5、 酶標(biāo)儀測定595nm波長處的吸光值,560~610nm之間的波長也可。

6、 根據(jù)標(biāo)準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

 

注意事項:

1、 G250染色液回復(fù)至室溫充分混勻后使用,有利于提高檢測的靈敏度。

2、 蛋白標(biāo)準在全部溶解后先混勻,再稀釋成一系列不同濃度的蛋白標(biāo)準。

3、 待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標(biāo)準也應(yīng)溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標(biāo)準中所含非蛋白成分不一致,有可能導(dǎo)致測定不準確。

4、 需可檢測560~610nm之間波長的酶標(biāo)儀一臺,優(yōu)良檢測波長為595nm

5、 建議每次測定時都做標(biāo)準曲線。因為測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深,并且顯色反應(yīng)的速度和溫度有關(guān),所以除非精確控制顯色反應(yīng)的時間和溫度,否則如需精確測定應(yīng)每次都做標(biāo)準曲線。

6、 如果沒有酶標(biāo)儀,也可以使用普通的分光光度計測定,但測定時,考慮根據(jù)比色皿的最小檢測體積。應(yīng)按比例適當(dāng)加大G250染色液的用量使總體積不小于最小檢測體積,樣品和標(biāo)準品的用量亦相應(yīng)按比例放大。使用分光光度計測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。

7、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個月有效。

NobleRyder Bradford蛋白定量試劑盒 

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