高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
適用于快速提取各種植物根、莖、葉、花的總RNA,gDNA過濾器能高效濾除gDNA,RNA可直接用于RT,RT-PCR,RT-qPCR,普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE、芯片等。高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
高效植物總 RNA 提取試劑盒
FlashPure Plus Plant Total RNA Mini Kit
高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取
目錄號:91452
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 91452-50(50 次) |
裂解液 PAL Plus | 30 ml |
去蛋白液 RW1 | 40 ml |
漂洗液 RW | 10 ml(需加入指ding量無水乙醇) |
RNase-Free H2O | 10 ml |
DNA 清除和 RNA 吸附通用柱 | 100 套 |
RNase-Free 1.5ml 離心管 | 50 支 |
自備試劑
無水乙醇
保存條件
室溫(15 ~ 25℃)
產(chǎn)品簡介
適用于快速提取各種植物根、莖、葉、花的總RNA,gDNA過濾器能高效濾除gDNA,RNA可直接用于RT,RT-PCR,RT-qPCR,普通轉(zhuǎn)錄組測序、RACE、芯片等。
本試劑盒是同類產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛,不但可以提取小麥、玉米、水稻、大豆、番茄、煙草、擬南芥等簡單植物,也可以提取茶樹葉片、棉花葉片、葡萄葉片、楊樹葉片、番薯葉片、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物。
如果遇到果實、種子、中草藥,例如:多糖多酚巨高的作物種子(小麥/玉米/大豆/水稻)、葡萄果實、藍莓果實、百合鱗莖、土豆塊莖;或者次級代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根、虎杖、雪蓮等藥用植物,請選擇91513-果實種子總RNA提取試劑盒。
產(chǎn)品特點
1. 無毒:免氯仿、免β-巰基乙醇!
2. 高質(zhì):28s/18s=2:1,OD260/280=2.0~2.2!
3. 高效:提取全過程僅需 20min!
重要提示:
a. 第一次使用前請先在漂洗液RW中加入指ding量無水乙醇,詳見瓶身的標(biāo)簽。
b. 所有離心步驟均需要在室溫(15 ~25℃)下進行。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
操作步驟:
1. 材料處理:
a.在液氮中研磨植物組織成細粉,取 50 ~ 100 mg 細粉加入 600 μl裂解液 PAL Plus,立即劇烈渦旋震蕩 30 sec,充分混勻。
b.將裂解物 13,000 rpm 離心 5 ~ 10 min,沉淀不能裂解的碎片。
2. 小心吸取 500 μl 上清轉(zhuǎn)入一個 DNA 清除和 RNA 吸附通用柱(以下簡稱通用柱),13,000 rpm 離心 1 min,DNA 被吸附在膜上,丟棄帶吸附膜的內(nèi)柱,保留濾液(RNA 在濾液中)。
3. 向濾液中加入 0.5 倍體積 (一般 250 μl ) 的無水乙醇,吹打混勻。
4. 轉(zhuǎn)移濾液混合物至一個新的通用柱中(通用柱已放入收集管中),13,000rpm離心1 min,倒棄濾液。此時,RNA被吸附在膜上。
5. 加入700μl去蛋白液RW1,室溫放置1min,13,000rpm離心30sec,倒棄濾液。
6. 加入500μl漂洗液 RW,13,000rpm離心30sec,倒棄濾液。
7. 重復(fù)步驟 6。
8. 將通用柱放回空收集管中,13,000 rpm 離心 2 min,除去膜上殘留的乙醇。
9. 取出通用柱的內(nèi)柱,放入 1.5ml RNase-free 離心管中,向吸附膜的中央懸空滴加 30-50μl RNase-free H2O,室溫放置 1 min,13,000 rpm 離心 1 min。
10. 提取的總 RNA,可直接用于下游實驗,或于-70℃保存,以免降解。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)
附錄:
一、免液氮直接研磨(自動研磨儀)—— 適用于新鮮樣本
a. 在 2.0 ml 液氮研磨管中放入2粒4 mm 的鋼珠,加入600 μl 裂解液 PAL Plus,放入≤60 mg 樣本,設(shè)置65個頻率,震蕩 2 min。
b. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 – 10 min,沉淀不能裂解的碎片。
二、液氮研磨(自動研磨儀)—— 適用于各種樣本,尤其是富含糖酚含或
易降解的樣本
a. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3 mm鋼珠3粒,放進≤50 mg 樣本,投入液氮中預(yù)冷。把研磨模塊也丟到液氮中預(yù)冷,直到?jīng)]有氣泡冒出視為預(yù)冷完畢。
b. 把預(yù)冷好的離心管插入研磨模塊中,放進研磨儀,設(shè)置55個頻率,震蕩 30 - 60 sec。(以北京赫得京 N9548 為例)
c. 研磨完成后,馬上加 500μl 裂解液 PRL 和 50μl 糖分去除劑 PAD,劇烈渦旋 30 sec。
d. 將裂解物 13,000 rpm 離心 5 - 10 min,沉淀不能裂解的碎片。
高效植物總RNA提取試劑盒 核酸提取