DNase I 膜上消化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品
本產(chǎn)品兼容所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒,用來去除基因組DNA。任何總RNA提取試劑盒都無法wan全避免DNA的微量殘留,GeneBetter 的RNA提取產(chǎn)品,由于采取了本公司du特的緩沖體系和特殊硅膠吸附膜,可以去除絕大多數(shù)的DNA污染,所以一般不用進(jìn)行DNase I消化。DNase I 膜上消化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品
RNase-Free DNase Set
DNase I 膜上消化試劑盒(RNase free)
DNase I 膜上消化試劑盒 RNA提取配套產(chǎn)品
目錄號(hào):91314
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 保存 | 91314-50(50 次) |
去蛋白液 RW1 | 室溫 | 40 ml |
DNase I | -20℃ | 0.25 ml |
DNase Buffer | -20℃ | 1.25 ml x2 |
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本產(chǎn)品兼容所有硅膠膜離心柱式RNA提取試劑盒,用來去除基因組DNA。
任何總RNA提取試劑盒都無法wan全避免DNA的微量殘留,GeneBetter 的RNA提取產(chǎn)品,由于采取了本公司du特的緩沖體系和特殊硅膠吸附膜,可以去除絕大多數(shù)的DNA污染,所以一般不用進(jìn)行DNase I消化。但是對(duì)于一些敏感的下游實(shí)驗(yàn),需要去除微量的DNA殘留,可以購買本公司DNase I膜上消化試劑盒(RNase free),直接在離心柱的吸附膜上面消化殘留的DNA,然后經(jīng)過漂洗、洗脫,得到純凈的RNA。
注意事項(xiàng):
DNase Buffer含Mn2+,可能有輕度發(fā)黃發(fā)黑,甚至黑色沉淀為正?,F(xiàn)象,顛倒混勻后正常使用即可。
DNase是非常敏感,易物理損壞變性喪失活性,所以不要漩渦混勻DNase I和工作液。輕輕吹打或者上下顛倒混勻混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鮮的工作液。
操作步驟
第一次使用前請(qǐng)先在漂洗液 RW 中加入zhi定量無水乙chun,詳見瓶身的標(biāo)簽。
提示:所有離心步驟必須在室溫(15~25℃)下進(jìn)行。
1. 按照正常RNA提取步驟操作,裂解混合物加入RNA吸附柱并離心后(RNA包括殘留DNA被吸附到離心柱硅膠膜上),在加入去蛋白液RW1
步驟之前,按照以下步驟操作。
2. DNase I工作液配制:取45μl DNase Buffer和5μl DNase I至新的RNase-Free離心管中,輕輕吹打混勻。(處理多個(gè)樣品,按照比例放大)
注意:如果殘留DNA過多導(dǎo)致消化不wan全,可按比例加大使用mei量來提高消化效果(如90μl DNase I buffer和10μl RNase free DNase I)。
3. 加入350μl去蛋白液RW1,室溫放置1min,13,000 rpm 離心30sec,倒棄濾液。
4. 向RNA吸附膜的中央加入50μl的DNase I工作液,室溫放置15min。
5. 加入350μl 去蛋白液RW1,13,000 rpm離心30sec,倒棄濾液。
6. 下接“加入500μl 漂洗液 RW"步驟等后續(xù)步驟。如果是其它公司的試劑盒,則接最后的一個(gè)漂洗液漂洗等后續(xù)步驟。
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