RNAsafe無液氮RNA樣品保存液(RNAlater)
RNAsafe 是一種水相的,無毒的組織保存液體,可以迅速滲入新鮮組織細(xì)胞的胞漿中,在非凍狀態(tài)下原位穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞內(nèi)的RNA。適用于動物組織(心,肝,腎,肌肉,睪丸,腦,脾等)、培養(yǎng)細(xì)胞、RNA 病毒、果蠅、細(xì)菌、白細(xì)胞、全血、一些植物組織等。RNAsafe無液氮RNA樣品保存液(RNAlater)
RNAsafe 無液氮 RNA 樣品保存液
RNAsafe無液氮RNA樣品保存液(RNAlater)
目錄號:91115
產(chǎn)品內(nèi)容
產(chǎn)品成份 | 保存 | 91115-100 | 91115-1000 |
RNAsafe | RT | 100 ml | 1000 ml |
產(chǎn)品簡介
RNAsafe 是一種水相的,無毒的組織保存液體,可以迅速滲入新鮮組織細(xì)胞的胞漿中,在非凍狀態(tài)下原位穩(wěn)定和保護(hù)細(xì)胞內(nèi)的RNA。適用于動物組織(心,肝,腎,肌肉,睪丸,腦,脾等)、培養(yǎng)細(xì)胞、RNA 病毒、果蠅、細(xì)菌、白細(xì)胞、全血、一些植物組織等。
特別適合野外和臨床采集樣本,無需攜帶液氮,浸入RNAsafe后,新鮮組織細(xì)胞中RNA可以完好地在37℃下保存一天, 在25℃下保存一周, 4℃下保存一個月, 在-20℃或-80℃下長期保存。RNA 病毒樣品(如HCV 和HIV)可在37℃保存一個月。
產(chǎn)品特點(diǎn)
操作容易:將組織jian成適當(dāng)大小,浸沒在RNAsafe中即可使其RNA不被降解。
無需液氮:使樣品的保存不需液氮干冰或-80℃冰箱 尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規(guī)模采集。
方便運(yùn)輸:處理過的樣品能在25℃保存一周,使樣品郵寄和運(yùn)輸變得容易。
多次凍融: 經(jīng)RNAsafe處理的樣品可反復(fù)凍融多次,不影響提取的RNA 質(zhì)量。
可比性強(qiáng): 能減少重復(fù)實(shí)驗(yàn)中的誤差,對大規(guī)?;虮磉_(dá)譜的分析尤其有用。
兼容性廣: 多種總RNA提取試劑都可以用來提取保存在RNAsafe內(nèi)的樣品。還可直接用于組織切片免疫學(xué)和流式細(xì)胞分析而不影響RNA提取的質(zhì)量。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
一、如何使用RNAsafe:
RNAsafe只用于新鮮組織,浸泡入RNAsafe前禁止冷凍組織。只需要迅速將新鮮組織jian成長,寬,高任意一邊厚度<0.5厘米浸泡入RNAsafe即可(只要有一邊厚度不超過0.5厘米,RNAsafe可以迅速滲透,其它兩邊的尺寸并不重要)。將新鮮組織浸泡在5倍體積的RNAsafe中,按要求存放在適當(dāng)?shù)臏囟取?/span>
1. 動物組織
RNAsafe并不破壞或者溶解組織結(jié)構(gòu),因此浸泡在RNAsafe中達(dá)到滲透平衡的組織可以從RNAsafe中取出,然后切成更小的塊,然后放回到RNAsafe中下次繼續(xù)使用。小器官如小鼠肝,腎,和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAsafe中。
2. 植物組織
很多植物組織直接浸泡入RNAsafe即可,有的植物有天然滲透屏障如臘質(zhì)保護(hù)層,需要先破壞掉臘質(zhì)層,便于RNAsafe滲透。
3. 組織培養(yǎng)細(xì)胞
細(xì)胞吹打下來后,離心收集細(xì)胞,棄上清,用冰浴的PBS緩沖液洗一次去除殘留培養(yǎng)液。將細(xì)胞懸浮在少量PBS緩沖液中。加入五到十倍體積RNAsafe, 混均。
4. 血和血漿
和紅細(xì)胞和血清分離的白細(xì)胞可以和組織培養(yǎng)細(xì)胞一樣的保存。RNAsafe也可以保存抗凝全血,血清和血漿。對于全血加入3倍體積RNAsafe,混勻。
5. 酵母
離心收集3X108的細(xì)胞(>12,000g離心兩分鐘),立刻將細(xì)胞團(tuán)重懸在0.5~1 ml 的RNAsafe中。酵母細(xì)胞可以保存在RNAsafe中25℃8小時或者4℃一個星期。如果要保存存更長時間,將酵母細(xì)胞在RNAsafe中放置一個小時后, 再次于>12,000g離心5分鐘,將酵母細(xì)胞團(tuán)放入液氮瞬時冷凍后放置于–80℃儲存。
6. 細(xì)菌
細(xì)菌并不能在RNAsafe 中生長,但是RNAsafe并不破壞細(xì)菌,E. coli在4℃ 保存一個月仍舊可以提出完整的RNA。
二、RNAsafe中樣本的存放:
1. 存放在–80℃
文檔樣品長期保存用。將RNAsafe中樣本放置于4℃過夜,然后將樣本撈出,盡量去除干凈RNAsafe液體,然后放置于–80℃. 對于組織培養(yǎng)細(xì)胞,則不需要去除RNAsafe,直接冷凍于–80℃,并不會裂解細(xì)胞。樣品使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。
2. 存放在–20℃
將RNAsafe中樣本放置于4℃過夜,然后轉(zhuǎn)移到–20℃。在–20℃樣品并不會被冰凍,但是可能會形成一些結(jié)晶,這并不會影響將來的RNA提取。樣品使用時可以在室溫融化,并且還可以再次冷凍而不影響RNA的完整性和產(chǎn)量。
3. 存放在4℃
樣本可以在4℃存放一個月。
4. 存放于25℃
存放于25℃樣本的RNA在一周內(nèi)保持完整,保存兩周的樣品RNA有輕微降解,勉強(qiáng)能用于northern analysis, 但是質(zhì)量足夠用于nuclease protection assay or RT-PCR analysis。
5. 存放于37℃
存放于37℃樣本的RNA在24小時內(nèi)保持完整,3天的時候有部分降解。
三、RNAsafe 保存樣本的 RNA 提取:
將樣本從RNAsafe中取出,RNAsafe可以直接倒入水池,用自來水沖洗即可,不需特殊處理。
1. 組織
需要用干凈鑷子將樣本從RNAsafe中撈出,用吸水紙稍稍吸去殘留的RNAsafe后,可以和新鮮組織一樣按照液氮研磨,然后勻漿處理的標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行提取RNA。
2. 細(xì)胞
對于儲存在RNAsafe中的細(xì)胞有兩種選擇。一是去除RNAsafe后提取RNA, 另一個是直接從細(xì)胞和RNAsafe的混合物提取。
a. 去除 RNAsafe 后提取 RNA
存放于RNAsafe中的細(xì)胞變得不那么脆弱,可以承受較高的離心速度而不被裂解。我們有在5000g離心成功收集細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn),由于每種細(xì)胞的強(qiáng)度不一樣, 可以先用不重要的細(xì)胞做個預(yù)試驗(yàn),以保證在使用的速度下離心不會破壞細(xì)胞。另一個選擇是在離心前加等體積的
PBS稀釋RNAsafe和細(xì)胞的混合物,以減少溶液的密度,使細(xì)胞溶液可以沉淀下來。
b. 不去除 RNAsafe,直接提取 RNA也可以直接加10倍體積的一步法提取試劑(如RNAzol,Trizol reagent)到細(xì)胞和RNAsafe的混合物,然后按照正常步驟操作。
相關(guān)產(chǎn)品:
71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit(for PCR or qPCR)
71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase(for qPCR)
71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)
RNAsafe無液氮RNA樣品保存液(RNAlater)